【重磅】人用和兽用噬菌体治疗活性物质和药品写入药典

前言

2021年6月，欧洲药典委员会（EPC）在其第170届会议上同意制定一个新的通则（general chapter）章节——人用和兽用噬菌体治疗活性物质和药品（5.31），并将这一任务分配给新成立的噬菌体工作组（BACT WP）。现该章节草案已经拟定，正面向欧洲公众开放征询意见（截至6月底）。这是噬菌体治疗活性物质/药品写入药典。本文为该通则的中文翻译版。

1-1. 定义 DEFINITION

噬菌体是感染细菌并依赖其细菌宿主进行复制的病毒。噬菌体由单链或双链DNA或RNA组成的基因组和外层包裹的蛋白质衣壳组成。噬菌体治疗医药产品（Phage therapy medicinal products，PTMPs）是天然存在或基因修饰的噬菌体的制剂，用于治疗人类或动物细菌感染或其他医学病症。PTMP可含有一种噬菌体治疗活性物质，或噬菌体混合物，或与赋形剂结合。PTMPs可以通过多种途径给药，可赋予不同剂型。

1-2. 生产 PRODUCTION

噬菌体通过在细菌宿主菌株中繁殖获得，并使用合适的方法纯化。生产过程需产生一致质量和稳定的PTMP。在相关的时间点和/或生产过程中的关键中间阶段实施合适的过程内检测。PTMPs的生产是基于一个合格的种子批系统，该系统使用已被验证适合的宿主-噬菌体组合。

2-1. 一般规定

噬菌体通过在细菌宿主菌株中繁殖获得，并使用合适的方法纯化。生产过程需产生一致质量和稳定的PTMP。在相关的时间点和/或生产过程中的关键中间阶段实施合适的过程内检测。PTMPs的生产是基于一个合格的种子批系统，该系统使用已被验证适合的宿主-噬菌体组合。

2-2. 细菌主细胞库和工作细胞库

用于PTMP生产的细菌宿主细胞必须在菌株水平上详细表征，包括菌株来源，随后的操作和用于鉴定菌株表征的测试。

用于PTMP生产的细菌细胞来源于合格的细菌主细胞库（Master Cell Bank），必须为单克隆来源并符合以下要求:

• 微生物纯度：通过铺板或其他合适的方法来确定是否存在微生物污染物。
• 鉴定：该细菌菌株通过合适的表型和基因型方法进行表征，优选全基因组测序、生化或分子基因测试或质谱分析。该分型须包括抗生素敏感性谱及其染色体和质粒的核苷酸序列。在PTMP生产中避免使用编码污染源（如原噬菌体）或其他有害因素（如抗生素耐药性决定因素、毒素）的菌株，除非另有正当理由和授权。
• 细胞活力：活细胞的数量由平板计数或其他合适的活细胞计数方法确定。
• 噬菌体敏感性：菌株对噬菌体治疗活性物质的敏感性用噬菌斑试验或其他合适的方法来证明。
• 无不利噬菌体：证实没有可能对PTMPs不利的噬菌体（如溶原性噬菌体）。

用于生产的工作细胞库（Working Cell Bank）是主细胞库的克隆衍生物，符合活力、微生物纯度和噬菌体敏感性的要求。

2-3. 用于生产PTMPs的噬菌体

PTMP生产中使用的噬菌体须详细表征。需提供有关噬菌体来源、核苷酸序列和易感细菌种类的信息。避免使用编码已知或潜在有害遗传因素的噬菌体，如抗生素耐药性决定因素、毒素、溶原性模块或其他元素，除非另有正当理由和授权。

只有符合以下要求的主噬菌体库（Master Phage Banks）才能用于生产：

• 鉴定：噬菌体通过合适的表型和基因型方法进行